MTT法
一、服務介紹
細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的細胞,用來補充體內衰老和死亡的細胞;同時,多細胞生物可以由一個受精卵,經過細胞的分裂和分化,最終發育成一個新的多細胞個體。必須強調指出,通過細胞分裂,可以將復制的遺傳物質,平均地分配到兩個子細胞中去??梢?,細胞增殖是生物體生長、發育、繁殖和遺傳的基礎。真核細胞的分裂方式有三種,即有絲分裂、無絲分裂和減數分裂。
二、實驗原理
MTT即3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide?;罴毎€粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結晶甲瓚(Formazan)并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。然后采用二甲基亞砜(DMSO)溶解細胞中的甲瓚,用酶聯免疫檢測儀在570 nm波長處測定其光吸收值,反映活細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶形成的量與細胞數成正比。
三、實驗流程
(以貼壁細胞為例)
1.收集對數期細胞,調整濃度;
2.將細胞種植于96孔板中,待細胞貼壁后(約4-12 h)加藥;
3.5% CO2,37oC孵育一定時間;
4.每孔中加入200 μL MTT溶液(配制成5 mg/ml),培養4 h;
5.吸去孔內的培養液,加入150 μL DMSO,可繼續孵育4 h,使結晶物充分溶解;
6.取出96孔板,將其置于酶聯免疫檢測儀上,震蕩15 s,然后在570 nm(630 nm校準)下測量吸光值。
7.結果統計分析
四、服務說明
1.客戶提供:培養好的細胞和作用藥物;
2.公司提供:基本實驗步驟、數據結果及分析、圖片、剩余藥品;
3.實驗周期: 1-2周左右,具體需要根據細胞生長情況及實驗內容而定。
五、質量承諾
提供清晰的圖片、可靠的檢測數據和分析結果。
CCK8試劑盒法
一、服務介紹
細胞增殖是生物體的重要生命特征,細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物,以細胞分裂的方式產生新的細胞,用來補充體內衰老和死亡的細胞;同時,多細胞生物可以由一個受精卵,經過細胞的分裂和分化,最終發育成一個新的多細胞個體。必須強調指出,通過細胞分裂,可以將復制的遺傳物質,平均地分配到兩個子細胞中去??梢?,細胞增殖是生物體生長、發 育、繁殖和遺傳的基礎。真核細胞的分裂方式有三種,即有絲分裂、無絲分裂和減數分裂。
二、實驗原理
CCK-8試劑盒是Cell Counting Kit-8的簡稱。其原理是用WST-8四唑鹽(2-(2-methoxy-4-nitrophenyl)- 3- (4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium)能被活細胞內的脫氫酶還原成橙色甲臜染料,然后測定450 nm下的吸光值,生成的甲臜的量與活細胞數量成正比。
三、實驗流程
1.收集對數期細胞,調整濃度;
2.將細胞種植于96孔板中,待細胞貼壁后(約4-12 h)加藥;
3.5% CO2,37oC孵育一定時間;
4.每孔中加入10 μL CCK-8溶液,培養4 h;
5.取出96孔板,將其置于酶聯免疫檢測儀上,震蕩15 s,然后在450 nm(650 nm校準)下測量吸光
6.結果統計分析。
四、服務說明
1. 客戶提供:培養好的細胞和作用藥物
2. 公司提供:基本實驗步驟、數據分析結果、剩余藥品。
3. 實驗周期:1-2周左右,具體需要根據細胞生長情況及實驗內容而定。
五、質量承諾
提供清晰的圖片、可靠的檢測數據和分析結果
收費標準/服務周期/提供結果:
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