網狀纖維(reticular fiber)網狀纖維在疏松結締組織中含量較少,纖維較細,有分支,彼此交織成網狀。 用浸銀法可將纖維染成黑色,故又稱嗜銀纖維 (argyrophilic fiber)。電鏡觀察,網狀纖維具有等間距的 橫紋結構,其化學成分也是膠原蛋白,和膠原纖維相似。網狀纖維的嗜銀性是由于包在原纖維上的糖蛋白所致。
實驗技術原理:
氨銀液被組織吸咐與組織中的蛋白結合,經甲醛還原成黑色的金屬銀沉積于組織內及表面。用氯化金調色 后,再用硫代硫酸鈉液洗去未還原的銀鹽,從而將組織內的網狀纖維清晰地顯示出來。
實驗操作流程:
1、切片脫蠟至水,蒸餾水洗,
2、用0.5%高.錳.酸.鉀氧化5min,
3、自來水洗,繼用蒸餾水洗,
4、用2%草酸漂白切片2min,
5、自來水洗,蒸餾水洗,
6、2%硫酸鐵銨媒染5min,
7、水洗,蒸餾水洗,
8、滴入氨性銀溶液浸染3-5min,
9、蒸餾水洗數次, 10、10%甲醛液還原5-10min,
11、水洗2min,
12、用核固紅染色10-15min,
13、水洗10min,各級酒精脫水,
14、常規透明,中性樹膠封固。 結果:網狀纖維黑色,核紅色,膠原纖維黃棕色。
網狀纖維鍍銀染色 x100
客戶提供:
1、組織樣品:新鮮組織放入液氮或-80度保存,組織不少于100mg;
2、培養細胞:通過細胞計數取不少于2×106個細胞于EP管,加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑,混勻后保 存于冰箱(-80℃,避免反復凍融);
3、血液細胞標本:以抗凝管保存血樣或以淋巴細胞分離液分離細胞后加入0.5ml生理鹽水或蛋白保護劑, 保存(-80℃可長期保存,避免反復凍融);
4、血清或細胞培養液標本:離心去掉雜質后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可長期保 存,避免反復凍融);
5、石蠟切片,冰凍切片以及細胞爬片,涂片等。
樣本運輸:
可選擇以下任何一種方式寄送標本
①組織樣本、細胞樣本以干冰運輸或加入蛋白保護劑后,加冰袋寄送;
②細胞樣本也可直接寄送培養瓶(密封保證不污染、培養液不漏出);
③血清或上清液直接加冰袋寄送(送視路程遠近2-3天可到達)。
交付標準:
1、圖片;
2、完整項目報告(材料、試劑、儀器、方法、數據分析、實驗結果)。
其他:
1、所使用的玻璃儀器,須用清潔液處理。
2、配制氨銀溶液時,氨.水加入的量不能過多或不足,過多感應下降,會使液體過堿,滴染時,切片容易 脫落,過少則感應上升,浸染效果不佳,不好掌握。
3、配制氨銀液時,有可能用玻璃蒸餾水。
4、使用的化學試劑應盡量用分析純以上。
5、切片氧化漂白應徹底,不能使殘存的福爾馬林留于片上,否則將導致過早還原而使浸染不均勻。
6、如果有某種原因而導致切片脫落時,應使用涂膠的載片,以增加附貼性。
7、如有可能,氨銀溶液以新配為佳,但也可保存于4℃冰箱中達一個月左右,這種液體易揮發,用后即須 蓋緊,當沉淀物出現時,該溶液應拋棄。
8、應秀氯化金調色時,可將膠原纖維著染的黃棕色去除掉。
收費標準/服務周期/提供結果:
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