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一、心肌缺血實驗模型：

        以手術方式短暫結扎冠脈的左前降支。其中結扎階段屬于缺血過程，而解除結扎后屬于再灌注過程。該模 型根據實驗需求可延長再灌注足夠長的時間。這一模型造成的是局灶性的心肌IRI，比較符合機體IRI的病 理過程，但是實驗結果受手術和機體內環境的影響較大。

實驗動物： C57BL/6J小鼠 ，雄性

體重：22g±2g

周齡：8周

動物等級：SPF級

手術方法： 

       動物深度麻醉，確認麻醉狀態后，備皮，安裝好心電監護儀，消毒局部皮膚，鋪洞巾后剪開肋間皮膚， 鈍性分離肌肉、打開心包膜，將心臟推出體外，暴露左冠狀動脈前降支，用6-0無菌絲線快速結扎，打活 結，看到心臟底部變白，用荷包縫法迅速關閉胸腔，擠壓防止氣胸，造成左室前壁心肌缺血。分別記錄術 前、缺血時心電圖變化。

到達缺血時間以后，打開胸腔，解開活結，再次關閉胸腔，縫合肌肉皮膚，進行心肺復蘇。分別記錄術 前、缺血時和再灌注后的心電圖變化。造模成功后進行藥物治療，術后觀察動物活動、采食情況。處死前 對實驗動物采血。術后進行心肌組織取樣、TTC-Evans blue染色，進行心梗面積計算。

手術后護理及觀察：

1、術后護理：術后單籠飼養，常規飼料及飲水。

2、觀察：每天觀察動物死亡或瀕死情況、精神狀態、行為活動、進食等。 

3、傷口局部觀察：術后每天1次，觀察傷口有無紅腫發炎等。 

4、體重稱量記錄：術后體重稱量記錄：術后2次/周，稱重并記錄體重變化情況。 

二、腦缺血動物模型 腦缺血在臨床上具有較高的發病率和死亡率，嚴重危害中老年患者健康，尋找有明確療效且作用機制清晰 的預防和治療腦梗死的藥物是當前研究的前沿課題和熱點領域。因此，腦缺血動物模型的制備在科學研究 中具有重要意義。 

剪開頸部皮膚，鈍性分離頸部肌肉，暴露并游離單側頸動脈，穿線備用。 

動脈夾暫時夾閉主動脈，并結扎頸外動脈。主動脈用注射器針頭挑開小口，插入自制線栓到頸內動 脈，大約 2.5-3cm。結扎頸內動脈，結扎主動脈近心端，松開動脈夾。 

逐層縫合，根據實驗的需要的缺血時間進行拔栓手術（再灌注），拔栓時動物要完全麻醉，把出線栓 的長度約為 0.5cm。 模型成功的評判方法 神經功能缺損（NDS）評分 0 分：活動基本正常，無明顯神經病學癥狀； 

1 分：左側前爪無法完全伸展； 

2 分：爬行時向左側轉圈； 

3 分：行走時向偏癱側傾倒； 

4 分：不能自動行走，有意識障礙 

5 分：死亡 

水迷宮實驗 Morris 水迷宮（Morris water maze, MWM）實驗是一種強迫實驗動物（大鼠、小鼠）游泳，學習尋找 隱藏在水中平臺的一種實驗，主要用于測試實驗動物對空間位置感和方向感（空間定位）的學習記憶能力。 

TTC 染色 TTC 染色是常用來評價腦缺血損傷的指標，缺血區域會呈白色。

HE 染色 一般發生缺血損傷的腦組織的神經元細胞會受到明顯損傷（上側正常，下側損傷） 

TUNEL 染色 發生損傷的腦組織，TUNEL 染色的細胞會明顯增多。